Coluna SEC para Purificação de Vesículas Extracelulares
O Vesi-SEC Micro é uma coluna de centrifugação para purificação rápida e eficiente de vesículas extracelulares, também conhecidas como EVs, a partir de amostras complexas. A tecnologia utiliza cromatografia de exclusão por tamanho, ou SEC, para separar vesículas extracelulares de proteínas solúveis, corantes livres, anticorpos não ligados e outros contaminantes de baixo peso molecular.
Desenvolvido para amostras de pequeno volume, o Vesi-SEC Micro permite realizar o clean-up de EVs de forma simples, rápida e reprodutível, preservando a integridade, a estrutura e a funcionalidade das vesículas extracelulares para análises posteriores.
É uma solução indicada para laboratórios que trabalham com exossomos, vesículas extracelulares, nanopartículas biológicas e partículas ligadas à membrana, especialmente quando a qualidade da amostra impacta diretamente a sensibilidade e a confiabilidade dos resultados.
Purificação rápida de EVs por cromatografia de exclusão por tamanho
A cromatografia de exclusão por tamanho é uma técnica utilizada para separar partículas e moléculas com base em seu tamanho. No preparo de amostras de vesículas extracelulares, essa abordagem permite separar EVs de componentes menores, como proteínas solúveis, corantes fluorescentes livres, anticorpos em excesso e outros contaminantes que podem interferir nas análises.
O Vesi-SEC Micro utiliza o formato de coluna de centrifugação para simplificar esse processo. Em vez de um fluxo de trabalho longo e manual, a purificação pode ser realizada em aproximadamente 1 minuto, utilizando centrifugação a 1.000 × g.
Essa abordagem contribui para a obtenção de amostras de EVs mais limpas e adequadas para caracterização, detecção e análises funcionais.
Você não precisa escolher entre recuperação de amostra e sensibilidade
Em análises em nanoescala, resíduos e impurezas podem comprometer a interpretação dos dados. Excesso de corantes, anticorpos não ligados ou contaminantes menores podem aumentar o ruído de fundo, reduzir a sensibilidade analítica e dificultar a identificação precisa das vesículas extracelulares.
O Vesi-SEC Micro foi desenvolvido para remover rapidamente esses interferentes, mantendo alta recuperação de amostra e contribuindo para análises mais sensíveis e confiáveis.
A matriz Core-Sep permite o uso de força centrífuga em uma coluna SEC, combinando simplicidade operacional com desempenho adequado para amostras de EVs, exossomos e outras nanopartículas biológicas.
Clean-up de amostras antes de análises sensíveis
O Vesi-SEC Micro é especialmente útil em fluxos de trabalho que envolvem marcação fluorescente, incubação com anticorpos ou preparo de amostras antes de técnicas sensíveis de análise de partículas.
Após a incubação da amostra com corantes ou anticorpos, a coluna pode ser utilizada para remover o excesso de reagentes livres, ajudando a reduzir interferências e melhorar a qualidade dos dados obtidos nas análises posteriores.
O produto pode ser utilizado no preparo de amostras antes de técnicas como:
Citometria de fluxo
Fluorescence Nanoparticle Tracking Analysis, ou F-NTA
Fluorescence microfluidics resistive pulse sensing, ou F-MRPS
Nano-flow cytometry
Microscopia confocal
Single-molecule localization microscopy, ou SMLM
Single-particle interferometric reflectance imaging sensor, ou SP-IRIS
Aplicações do Vesi-SEC Micro
O Vesi-SEC Micro pode ser utilizado em diferentes etapas de preparo e purificação de amostras contendo vesículas extracelulares e nanopartículas biológicas.
Entre as principais aplicações estão:
Purificação de vesículas extracelulares
Purificação de exossomos
Clean-up de amostras de EVs após marcação fluorescente
Remoção de corantes livres
Remoção de anticorpos não ligados
Separação de proteínas solúveis e contaminantes menores
Preparo de amostras para F-NTA
Preparo de amostras para citometria de fluxo
Preparo de amostras para microscopia de fluorescência
Preparação de EVs para análises posteriores
Além de vesículas extracelulares e exossomos, a tecnologia também pode ser aplicada em fluxos de trabalho envolvendo partículas ligadas à membrana e nanopartículas biológicas, conforme a necessidade experimental.
Operação simples em três etapas
O Vesi-SEC Micro foi desenvolvido para simplificar o preparo de amostras, mantendo um fluxo de trabalho rápido e reprodutível.
O processo pode ser resumido em três etapas principais:
1. Remoção do tampão de armazenamento
A coluna é preparada por centrifugação para remoção do tampão inicial.
2. Lavagem com tampão limpo
A coluna é equilibrada com tampão filtrado, ajudando a preparar a matriz para receber a amostra.
3. Aplicação da amostra e eluição
A amostra é aplicada cuidadosamente no centro do leito da coluna e centrifugada. O eluído coletado contém a amostra de EV purificada.
Para melhor desempenho, recomenda-se o uso de centrífuga com rotor oscilante, também conhecido como swing-bucket, pois esse tipo de rotor favorece uma eluição mais uniforme durante o processo.
Diferença entre Vesi-SEC Micro e Vesi-SEC Midi
A linha Vesi-SEC está disponível em versões para diferentes volumes de amostra.
O Vesi-SEC Micro é indicado para amostras de 50 a 100 µL, sendo uma opção adequada para pequenos volumes, amostras limitadas ou ensaios em que a recuperação do material é especialmente importante.
Já o Vesi-SEC Midi é indicado para volumes maiores, de 0,5 a 1 mL, atendendo fluxos de trabalho que exigem maior volume de processamento.
A escolha entre as duas versões depende principalmente do volume disponível e da escala de purificação necessária.
Especificações técnicas do Vesi-SEC Micro
Produto: Vesi-SEC Micro
Formato: colunas de centrifugação contendo 500 µL de Core-Sep gel
Volume de amostra: 50 a 100 µL
Capacidade de carregamento: 1E + 11 partículas/mL
Quantidade: 24 colunas por caixa
Centrifugação: 1.000 × g por 1 minuto
Rotor recomendado: rotor oscilante ou swing-bucket
Temperatura de uso no protocolo: +15 a +25 °C
Armazenamento e recomendações de uso
O Vesi-SEC Micro deve ser armazenado sob refrigeração, conforme as orientações técnicas do fabricante.
Para obter melhor desempenho durante o preparo e purificação das amostras, recomenda-se:
Utilizar centrífuga com rotor oscilante
Manter a coluna na posição vertical durante o procedimento
Aplicar a amostra lentamente no centro do leito da coluna
Evitar sobrecarregar a coluna
Utilizar tubos de baixa aderência para minimizar perda de amostra
Filtrar tampões e diluentes antes do uso
Preservar as amostras de EVs em tampão adequado, como Vesi-Safe, quando aplicável
Vesi-SEC Micro para preparo de amostras de vesículas extracelulares
O Vesi-SEC Micro oferece uma solução prática para laboratórios que precisam purificar EVs e exossomos em pequenos volumes, com foco em rapidez, simplicidade operacional e preservação da qualidade da amostra.
Ao remover proteínas, corantes livres, anticorpos em excesso e outros contaminantes menores, a coluna contribui para a preparação de amostras mais adequadas para análises sensíveis de vesículas extracelulares.
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